云朵百科什么是考马斯亮蓝法Bradford法）？bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通...
什么是考马斯亮蓝法Bradford法）？
bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。不利因素主要是特殊蛋白的结构，缓冲液组分中有干扰试剂等。
考马斯亮蓝g-250法测定蛋白质含量的优势？
考马斯亮蓝G-250法是一种常用的蛋白质含量测定方法。它的优势在于其灵敏度和准确性较高，可以在较短时间内准确测量蛋白质含量。此外，该方法操作简便、成本较低，适用于各种生物组织、细胞和样品中的蛋白质测定。
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法有什么优点？
考马斯亮蓝G250法测蛋白质含量比其他方法的优点是：
1.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；
2.其结合物在室温下1h内保持稳定。
3.该法试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1,000μg/mL，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。 考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。
考马斯亮蓝法与蛋白反应条件？
在酸性的反应条件下，考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合，导致最大吸收峰由465 nm 变为595 nm，同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合，测量在595 nm处的吸收值，在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下，蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
所以考马斯亮蓝法测定蛋白质的条件是在酸性条件下。
考马斯测定蛋白质含量时稀释倍数怎么定？
用考马斯亮蓝法时，稀释蛋白的倍数主要取决于标准曲线的情况。 比如用BSA作标准曲线，第一个点加入0.02mg/ml的BSA，其后依次增加为0.04、0.06、0.08、0.1mg/ml。那么需要测定的蛋白质就需要稀释到浓度在0.02~0.1mg/ml之间。
